蛋白質(zhì)印跡膜再生液
蛋白質(zhì)印跡膜再生液,即 Western 一抗二抗去除液(stripping Buffer),用于 Western 中膜的重復(fù)利用。 在 Western 中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后,有時(shí)還需要檢測(cè) tubulin、actin 等內(nèi)參,或?qū)φ湎】乖M(jìn)行多種抗體的交叉檢測(cè)。通過使用蛋白質(zhì)印跡膜再生液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過的膜進(jìn)行多種抗體的 Western 檢測(cè)。與跑多個(gè) SDS-PAGE 膠分別做不同抗體的 Western檢測(cè)相比,使用蛋白質(zhì)印跡膜再生液省時(shí)省力,節(jié)約珍貴抗原。同時(shí)可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強(qiáng)。使用蛋白質(zhì)印跡膜再生液重復(fù)處理同一張膜,會(huì)在一定程度上導(dǎo)致抗原信號(hào)的減弱。本 Western 膜再生液經(jīng)過多個(gè)抗體的檢測(cè)試驗(yàn),通??梢灾貜?fù)利用膜 3-5 次。只需大約 30 分鐘即可實(shí)現(xiàn)膜的重復(fù)使用,然后可以進(jìn)行封閉等后續(xù)的 Western blot 操作。